Un nou test molecular pentru diagnosticul rapid al infecțiilor fungice

În anumite regiuni ale Statelor Unite, infecțiile fungice profunde reprezintă o problemă importantă de sănătate publică, în special din cauza dificultăților de diagnosticare. Un grup de cercetători de la Indiana University Health și Indiana University School of Medicine a dezvoltat un test molecular capabil să detecteze simultan trei dintre cei mai importanți agenți patogeni fungici endemici, cu o viteză mult superioară metodelor tradiționale. Rezultatele vor fi prezentate la reuniunea Association for Molecular Pathology din noiembrie 2025.
Infecțiile fungice endemice din Statele Unite sunt strâns legate de expunerea la sol și afectează atât persoane sănătoase, cât și indivizi imunocompromiși. Diagnosticul clinic este adesea complicat de asemănarea cu alte afecțiuni respiratorii și de limitările testelor convenționale. Culturile fungice necesită săptămâni pentru a deveni pozitive, iar testele serologice pot da rezultate incorecte în stadiile precoce ale bolii. În plus, metodele actuale nu permit întotdeauna diferențierea clară a agenților patogeni, ceea ce întârzie tratamentul și crește riscul de evoluție severă.

Cele trei infecții vizate de noul test - histoplasmoza, blastomicoza și coccidioidomicoza - sunt endemice în regiuni geografice distincte și pot provoca pneumonii severe sau infecții diseminate. În fiecare an, mii de pacienți sunt diagnosticați inițial cu alte boli respiratorii înainte ca etiologia fungică să fie confirmată, ceea ce evidențiază nevoia urgentă de instrumente diagnostice rapide și fiabile.

Despre studiu

Obiectivul echipei de cercetare

Proiectul coordonat de Dr. Kenneth Gavina, director de microbiologie clinică la Eskanazi Health, a urmărit dezvoltarea unui test care să permită detectarea simultană a celor trei fungi endemici majori. Echipa s-a concentrat pe identificarea unor regiuni genetice strict specifice fiecărui agent patogen, astfel încât testul să ofere acuratețe maximă fără reactivitate încrucișată.

Metoda dezvoltată

Cercetătorii au creat un test de tip PCR în timp real, cu multiplexare, capabil să identifice materialul genetic al fungilor direct din probe clinice. Au fost selectate trei ținte moleculare:

• Regiunea ITS1 pentru identificarea Histoplasma;
• Gena BAD1 pentru Blastomyces;
• Gena A2/PRA pentru Coccidioides.

Prin utilizarea acestor secvențe specifice, testul reușește să evite interferențele cu alte fungi sau contaminanți, menținând în același timp capacitatea de a procesa mai multe ținte în aceeași reacție PCR.

Avantaje tehnice

Noul test introduce mai multe optimizări importante:

• eliminarea necesității de extracție prealabilă a ADN-ului, reducând riscul operator și timpul de prelucrare;
• bypass-ul complet al etapelor de cultură fungică, evitând săptămânile de așteptare;
• evitarea limitărilor testelor antigenice și serologice, care pot fi nespecifice sau negative în stadii precoce.

Platforma pe care rulează metoda este deja disponibilă în multe laboratoare clinice, ceea ce facilitează adoptarea acesteia la scară largă după validarea completă.

Performanța assay-ului

Compararea testului molecular cu metodele standard de diagnostic a arătat că:

• testul PCR a identificat cu acuratețe de 100% toate probele pozitive;
• specificitatea a fost, de asemenea, 100%, fără rezultate fals pozitive;
• diagnosticul poate fi obținut într-un interval de timp semnificativ redus față de cultură.

Aceste performanțe demonstrează potențialul ridicat al tehnicii pentru îmbunătățirea timpului de diagnostic și reducerea incertitudinii clinice.

Rezultate

• Testul PCR multiplex detectează simultan trei agenți patogeni fungici endemici cu sensibilitate și specificitate maxime.
• Metoda este mult mai rapidă decât cultura fungică și mai fiabilă decât testele serologice convenționale.
• Eliminarea necesității de extracție ADN reduce atât riscul biologic, cât și timpul de procesare.
• Platforma utilizată este deja implementată larg în laboratoare, ceea ce permite integrarea rapidă în fluxurile clinice.
• Testul răspunde unei nevoi critice, în contextul lipsei unor teste moleculare aprobate pentru aceste fungi în Statele Unite.

Concluzii

Noul test molecular pentru detectarea histoplasmozei, blastomicozei și coccidioidomicozei reprezintă un progres major în diagnosticul infecțiilor fungice endemice. Prin combinarea specificității genetice cu un timp de execuție scurt, metoda oferă o soluție modernă într-un domeniu în care opțiunile actuale sunt lente sau nesigure. Implementarea sa în practica clinică ar putea reduce întârzierile diagnostice, îmbunătățind prognosticul pacienților și reducând riscul de forme severe de boală.

Prezentarea oficială va avea loc în cadrul conferinței Association for Molecular Pathology 2025, unde cercetătorii vor discuta potențialele aplicații clinice și direcțiile de validare suplimentară. Acest demers marchează un pas important către modernizarea diagnosticelor pentru bolile infecțioase fungice greu de identificat.